比较严重溶血，以HRP为标识的ELISA代测中，残余在孔里的血红蛋白浓度具备过氧化酶样活性，催化反应底物显色剂造成假阳;混有红细胞的血清易沉积或依附在聚乙烯孔里不容易清洗;如果有真菌感染，菌体中有可能带有内源HRP，也会造成假阳性反应;样品凝结不全，有时候为了更好地争取时间快速检测，经常在血液还未开始凝结时即强制离心分离血清，使血清中仍残余一部分纤维蛋白原，在ELISA代测全过程中能够产生人眼看得见的纤维蛋白块，易造成假阳结论;采血试管清洗不完全、不断应用易交叉式污染;塑料试管能吸咐抗原化学物质，样品久置在塑料管里会使样品内抗原成分降低造成假阴性。

　　血清样品宜在新鲜时检验，比较严重溶血样品禁止使用。通常情况下，在5天内测量的血清样品可置放于4℃，样品在冰箱中保留时间太长造成血清IgG汇聚，使间接法的实验试剂本底变深。超出一星期测量的需-20℃保留。冻洁血清融掉后，蛋白质部分浓缩，遍布不均匀，应完全混匀并防止造成气泡。浑浊或有沉积的血清样品先要离心或过滤，澄清后再检验。不断冻融会使抗体效价坠落，因此测抗体的血清样品如需保留作数次检验，宜小量分开包装冰存;尽量应用1次性玻璃试管或真空管采血管;并应用非抗凝样品，肝素抗凝血浆会提升OD值，有可能与高浓度肝素具备强劲的负电荷能吸咐酶标识物不容易洗脱相关;EDTA、酶抑制剂（如NaN3）能抑制ELISA代测系统中辣根过氧化酶活性;血液标本采集后必需使其完全凝结后再分离血清，或标本采集时要带分离胶的采血管或于采血管中添加恰当的促凝剂。